"Customized nucleases，the leading edge technology for in vivo gene editing"李大力 博士(華東師范學大學）-2014.3.5

時間：2014年3月5日 10:00

地點：腦功能基因組學教育部重點實驗室一樓會議室

報告題目：Customized nucleases，the leading edge technology for in vivo gene editing

報告人：李大力 博士 華東師范學大學

主持人：周曉明 教授

報告人簡介：

華東師范大學生命科學學院副教授。2001年獲湖南師范大學學士學位，2007年獲湖南師范大學與美國德州農工大學聯合培養博士學位，同年就職于華東師范大學從事科研工作。目前擔任上海市調控生物學重點實驗室副主任。近年來一直從事轉基因和基因敲除小鼠模型構建新方法的研究，成功建立了基于TALEN和CRISPR-Cas系統的基因敲除技術，實現了快速高效的大鼠和小鼠基因敲除。 利用基因修飾動物模型開展了G蛋白偶聯受體在成體干細胞、生殖發育過程中的生理功能及調控機制的研究工作。近年來在國際知名生物學期刊Nature Biotechnology, Nucleic Acids Research和Development等雜志上發表研究論文30余篇。申請轉基因技術相關中國發明專利2項。

報告簡介：基因敲除動物模型一直以來是在動物體內開展基因功能研究、尋找合適藥物作用靶標的重要工具。傳統的基因敲除方法需要通過復雜的打靶載體構建、ES細胞篩選、嵌合體小鼠選育等一系列步驟，耗時較長費用高，具有一定局限性。我們利用近年發現的轉錄效應因子核酸酶（TALEN）技術，通過直接在受精卵中注射針對特定基因組序列的TALEN分子，構建了分布于小鼠不同染色體上的10多個基因敲除小鼠模型，提出了從靶點設計入手提高突變效率的改進方法（Nucleic Acids Research 2013）。然而TALEN技術在載體構建方面相對繁瑣，而且不容易針對多個基因在動物中一次性進行敲除。最近報導的CRISPR-Cas技術，在哺乳動物細胞中成功實現非常簡便的一次性敲除多個基因的研究。我們利用該方法成功的建立了基因敲除小鼠和大鼠動物模型，實現了在哺乳動物中一次敲除多個基因和基因組大片段刪除（Nature Biotechnology 2013）。在此基礎上，利用CRISPR-Cas技術，通過受精卵注射實現了報告基因定點插入的基因敲入小鼠的構建，這一應用將促使該技術全面超越經典的基因敲除技術，必將有廣闊的應用前景。